Ембріологія (допоміжний хетчинг, IVM, IMSI, FISH, ДНК-фрагментація)

Співробітники лабораторії ембріології – це досвідчені, висококваліфіковані ембріологи, з великим досвідом дослідницької роботи і публікаціями, і з повагою до особливих характеристик кожної подружньої пари, здатні надавати наукові послуги на найвищому рівні.

Ультрасучасна лабораторія ембріології, завдяки своєму висококваліфікованому персоналу, має найпередовіші системи для культивування ембріонів, що забезпечує стабільно високі показники успішного настання вагітності і забезпечує найкраще, що може запропонувати сучасна медицина в цій сфері.

Зокрема, лабораторія має спеціальну систему реєстрації температур, рівнів CO2, рН в інкубаторах для ембріонів та культуральних середовищ, щоб постійно і в режимі реального часу контролювати безперебійну та безперешкодну роботу всього лабораторного обладнання. Лабораторія також оснащена спеціальною системою, яка безперервно реєструє температуру, вологість і рівні органічних часточок у приміщенні, забезпечуючи тим самим середовище найвищої якості для процедур ЕКЗ та культивування ембріонів. Ці спеціальні системи реєстрації в лабораторії ембріології активні 24 години на добу, 7 днів на тиждень, а в неробочі дні вони підключені до спеціальної системи аварійного оповіщення, яка повідомляє черговому біологу про будь-яку проблему, яка могла виникнути.

Заморожені яйцеклітини, ембріони та сперма зберігаються в контейнерах з рідким азотом, які оснащені спеціальними детекторами температури, що постійно реєструють температуру.

Крім того, лабораторія ембріології зокрема і наша клініка загалом мають повністю автоматизовану систему відстеження всіх біологічних матеріалів і процедур наших пацієнтів – високотехнологічну систему під назвою “Космос”.

Передові допоміжні репродуктивні технології:

Кожен випадок безпліддя, який ми лікуємо в IAKENTRO, – унікальний. Застосовуючи цей підхід, ми впроваджуємо велику кількість сучасних методів, підібраних відповідно до індивідуальних потреб людини, щоб підвищити рівень успішності кожної спроби.

Допоміжний хетчинг

Ембріони, на перших стадіях розвитку, оповиті зовнішнім поясом, що називається “зона пеллюцида”, яка захищає клітини плода. В подальшому, на 5-й -6-й день поділу клітин, коли плід знаходиться в матці, ця зона в якийсь момент розривається (хетчинг) таким чином, що плід, який був всередині, може вийти і імплантуватися в ендометрії, щоб продовжувати рости.

Однак у деяких випадках виконання процедури ЕКЗ вважається необхідним сприяти хетчингу шляхом зменшення товщини зони пеллюциди. Цю процедуру проводять у день перенесення ембріонів за допомогою спеціальних лазерів. Ця методика значно збільшує можливості імплантації плода в матці.

Допоміжний хетчинг ембріонів перед перенесенням ембріонів рекомендується в таких випадках:

• Для жінок віком старше 37 років
• Для кріоконсервованих ембріонів
• Для жінок, які є “поганими відповідачами” на гормональне лікування
• Для жінок зі значеннями рівнів ФСГ вище середніх

Intracytoplasmic morphologically selected sperm injection (IMSI)

Відбір сперматозоїдів, які будуть використовуватися для запліднення яйцеклітин подружньої пари, здійснюється на основі критеріїв морфології та рухливості сперматозоїдів. Проте у деяких подружніх пар проведення цієї оцінки недостатньо. Зокрема, у таких випадках, як а) важке чоловіче безпліддя, пов’язане з незадовільними морфологічними характеристиками зразка, що призводить до низького рівня запліднення, або б) низька якість ембріона в попередніх невдалих спробах і випадки невиношування вагітності, рекомендується використовувати метод відбору морфологічно інтактної сперми з подальшим її введенням в яйцеклітини. Цей метод має ще одну додаткову перевагу порівняно з мікрозаплідненням (ICSI), оскільки він дозволяє ретельно відібрати сперму за допомогою спеціального мікроскопа з дуже великим збільшенням. Найкращі сперматозоїди відбираються згідно з певними морфологічними критеріями. Таким чином, передбачається, що покращена морфологія сперматозоїдів асоціюється з кращим потенціалом розвитку для ембріонів кращої якості та, зрештою, зі збільшенням відсотка випадків настання вагітності.

Флуоресцентна гібридизація in situ (FISH)

Часто невдалі спроби жінки із подружньої пари завагітніти або повторні випадки невиношування вагітності можуть приховувати генетичні або хромосомні аномалії, локалізовані в спермі чоловіка. Під час запліднення яйцеклітини та каріогамії (злиття ядер) ці аномалії переносяться на генетичний матеріал плода, і в таких випадках, як, наприклад, важка хромосомна анеуплоїдія, можуть бути причиною невиношування вагітності.

Що таке методика FISH, і як вона застосовується до сперми

Після оцінки всіх параметрів (концентрація, рухливість, морфологія сперматозоїдів) зразок сперми обробляється та фіксується, щоб можна було застосувати методику. При виконанні FISH використовуються спеціальні флуоресцентні детектори, які зв’язуються з ділянками ДНК у хромосомах. Таким чином, за формою флуоресценції детекторів ідентифікуються будь-які можливі анеуплоїдії в 12 досліджуваних хромосомах, а результати реєструються у відсотках.

Результати цієї методики – досить промовисті та можуть виявити, наприклад, аномальний відсоток анеуплоїдії в Y-хромосомі, що може бути пов’язаним з аномалією в ділянках генів, які спричиняють азооспермію у чоловіків. Лікар оцінює результати, і, залежно від відсотка анеуплоїдії та хромосоми (хромосом), у тих випадках, коли вона виявлена, він/вона направляє подружню пару для застосування найбільш підходящого методу ЕКЗ.

Тест ДНК-фрагментації сперми

Результати недавніх досліджень показали, що підвищені рівні ДНК-фрагментації у спермі, що спричинено сильним окислювальним стресом, може бути причиною того, чому жінка з подружньої пари не може завагітніти. Результати цих досліджень показують, що у зразках сперми, де відсоток сперматозоїдів із пошкодженням ДНК перевищує 30%, шанси на настання вагітності значно знижуються.

Дослідження на ДНК-фрагментацію сперматозоїдів рекомендоване в нижчезазначених випадках:

• Подружні пари з більш ніж 3 послідовними невдалими спробами виконання процедури ЕКЗ
• У випадках проведення процедури ЕКЗ, коли відзначається переривання внутрішньоутробного розвитку плода в перші дні після запліднення
• У разі повторних випадків невиношування вагітності
• У випадках наявності безпліддя нез’ясованого генезу

Дослідження рівня ДНК-фрагментації не пов’язане з параметрами, які досліджуються при проведенні аналізу сперми (спермограми). Таким чином, зразки з нормальною концентрацією, рухливістю та морфологією сперматозоїдів можуть мати підвищений відсоток ДНК-фрагментації, і навпаки.

У разі отримання результату, що свідчить про відхилення від норми, чоловікові рекомендується лікування антиоксидантом протягом принаймні 90 днів. Якщо після лікування не спостерігається покращення, може знадобитися виконання біопсії яєчка або екстракції сперматозоїдів яєчка (TESE або ТГАБ), щоб ДНК екстрагованих сперматозоїдів мала нижчий відсоток деформації.

Інноваційні чипи для сортування сперматозоїдів для обмеження ДНК-фрагментації сперми

Доведено, що ДНК-фрагментація сперми асоціюється зі зниженням відсотка частоти настання вагітності, оскільки при використанні відомих методів виділення та збагачення сперми не можуть виділити такі сперматозоїди з низьким індексом фрагментації ДНК.

Щоб подолати це обмеження, наразі доступний новий метод сортування і збагачення сперми: пристрій для сортування сперматозоїдів.

Це – одноразовий мікрорідинний чип для сортування сперми, який дозволяє виділяти рухливі сперматозоїди безпосередньо з необробленої сім’яної рідини, забезпечуючи збагачену популяцію нормальних сперматозоїдів з покращеними біологічними параметрами, включаючи цілісність ДНК.

Цей інноваційний чип для сортування сперматозоїдів:

• Функціонує на основі мікрофлюїдики, імітуючи нормальний шлях, яким сперматозоїди спрямовуються до яйцеклітин через слиз шийки матки, матку та фаллопієві труби. Нормальні та функціональні сперматозоїди проходять через мікропори чипа, на відміну від мертвих або менш рухливих сперматозоїдів або сперматозоїдів з порушеннями морфології.
• Після сортування в зразку сперми відмічається покращена рухливість і морфологія сперматозоїдів, нижчий рівень ДНК-фрагментації і нижчі рівні ROS (реактивних форм кисню) порівняно з початковим зразком.
• При його застосуванні усуваються потенційні небажані ефекти (підвищений рівень ROS) традиційних методів сепарації сперматозоїдів, і він не потребує попередньої обробки сперми, що зводить до мінімуму ризик інфікування.
• Остаточний зразок отримують лише через 30 хвилин; при цьому час підготовки скорочується.